动物实验的无菌技术（动物实验基本操作）
1.蟾蜍 用左手将动物握紧在手掌中，拇指和食指分别压住其左、右前肢，并以左手中指、无名指、小指压住其左腹和后肢，右手进行脑、脊髓破坏等操作。抓取时，禁止挤压两侧耳部的腺体，以免毒液射入眼中。
2.小鼠 小鼠温顺，一般不会咬人，抓取时先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或实验台向后拉，在其向前爬行时，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤，将鼠体置于左手掌中，把后肢拉直，以无名指按住鼠尾，小指按住后腿即可。这种在手中固定方法，能进行实验动物的灌胃，皮下、肌肉和腹腔注射。如进行解剖、手术、心脏采血和尾静脉注射时，则要将小鼠取背卧位(必要时先行麻醉)，再用胶布将鼠前后肢依次固定在蜡板上。尾静脉注射时，可用小鼠固定器固定。
3.大鼠 大鼠的抓取基本同小鼠，只不过大鼠比小鼠牙尖性猛，抓取时为避免咬伤，可带上帆布手套。如果进行腹腔、肌肉、皮下等注射和灌胃时，同样可采用左手固定法，只是用拇指和食指捏住鼠耳，余下三指紧捏鼠背皮肤，置于左掌心中，这样右手即可进行各种实验操作，也可伸开左手之虎口，敏捷地从后，一把抓住。若做手术或解剖等，则应事先麻醉或处死，然后用细棉线绳缚腿，背卧位绑在大鼠固定板上。尾静脉注射时的固定同小鼠。
4.家兔 抓取：一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起，然后左手托其臀部或腹部，让其重量的大部分集中在左手上，这样就避免了抓取过程中的动物损伤。不能采用抓双耳或抓提腹部。
固定：一般将家兔的固定分为盒式、台式。盒式固定(图3-24)，适用于兔耳采血、耳血管注射等情况。若行血压测量、呼吸等实验和手术时，则要将家兔固定在兔台上(图3-25)，四肢用粗棉绳活结绑住，拉直四肢，将绳绑在兔台四周的固定点上，头以固定夹固定或用一根粗棉绳挑过兔门齿绑在兔台铁柱上。
实验动物多用于建立不同疾病的动物模型。在微生物实验室中，常常会建立人感染性(病毒和细菌)疾病的动物模型，在实验操作上要求更加严格。
1.动物实验须遵循的原则
(1)人道地对待实验动物，给动物创造一个相对安静的环境，以免动物受惊;操作时动作尽量轻柔、小心，以免被咬伤;手术或处死动物时，以使其少受痛苦为原则。
(2)根据感染的微生物危险度选择造模环境，并保证其无菌和独立。
(3)整个实验过程均做好操作人员的个人防护，避免逆向感染。
(4)感染性动物模型饲养环境要保持相对隔离状态(根据危险度评估结果决定)。
(5)保证实验用菌(毒)株为唯一的感染源。
(6)避免对饲养的外环境污染。
(7)动物尸体及组织应严格按照规定进行处理。
2.动物实验中潜在的污染(或非正常感染)源
(1)实验器材，手术器械、注射器、器皿等。
(2)感染环境，空气、台面等。
(3)药物是否储存正常。
(4)操作者，包括呼吸、操作(注射、给药、取材等)。
(5)动物自身，包括皮毛、粪便等。
3.动物实验中的无菌操作
(1)准备阶段
1)实验所用器皿、手术器材等进行消毒灭菌(需有外包装)，必要时使用一次性无菌用品。
2)清洁消毒操作环境(空间、台面等)。
3)准备好个人防护设备(乳胶手套、口罩、抓捕手套、隔离衣等)。必要时(如手术后动物需存活，且要碰触动物内脏的手术)须戴无菌手套进行动物手术。戴无菌手套的原则是未戴手套的手，只允许接触手套的里面，已经戴手套的手只能接触手套的外面。
(2)实验阶段：实验步骤：称重→麻醉→脱毛→铺洞巾→手术→缝合→用抗生素抗炎。
1)动物无菌手术所用的耗材均应事先消毒灭菌并烤干，无菌用品均放置在清洁区域，避免操作者以外的人接触。
2)用完的物品要有指定位置存放(即手术中用过与未用的物品要分开放置);如要反复使用(如手术器械)，应做好清洁消毒工作，及时用75%乙醇消毒。
3)操作者双手避免接触污染区域(如擦眼、擦汗、校正口罩、打手机等)。
4)有感染性材料存在时，操作上尽量减少气溶胶的产生(如离心血清等)。
5)动物的手术、注射等部位要消毒彻底(手术前需用75%乙醇或碘酒擦拭皮肤，可用适量抗生素撒在手术伤口缝合处)。
6)头皮针、注射器用完后套好针头套(最好准备一个放置针头套的浅容器)，放入锐器盒。
7)灌胃时检查灌胃针头部是否被堵塞，灌胃的药物应事先37℃温浴，灌胃动作要轻柔顺畅，防止食道甚至内脏受伤。
8)实验中动物的粪便在清理掉后，要清洁接触面(必要时进行消毒)。提示：麻醉剂量要适量。
(3)清理阶段(按顺序清理)
1)动物尸体、组织包装好后按规定放入指定位置。
2)头皮针、注射器针头放入锐器盒后置于指定位置。
3)手术器械、仪器及其他实验材料的清理。
4)清洁实验台面、环境、动物装置等，用消毒液对所有用具及台面消毒。
5)摘除个人防护装备(先摘手套后摘口罩)，放入指定位置，最后用药皂洗手。
注意：如有感染性材料，均要行消毒灭菌处理。
